د حجرو کلتور چاپیریال د حجرو په تولید اغیزه کوي

د حجرو د کلتور یوه مهمه ګټه د حجرو د تکثیر فزیکي کیمیا (د بیلګې په توګه د تودوخې، pH، اوسموټیک فشار، O2 او CO2 فشار) او فزیولوژیکي چاپیریال (د بیلګې په توګه د هورمون او غذايي موادو غلظت) د سمبالولو وړتیا ده.د تودوخې سربیره، د کلتور چاپیریال د ودې منځني لخوا کنټرول کیږي.

که څه هم د کلتور فزیولوژیکي چاپیریال د دې فزیکي او کیمیاوي چاپیریال په څیر روښانه ندی، د سیرم اجزاو ښه پوهه، د ودې لپاره اړین عوامل پیژندنه، او په کلتور کې د حجرو مایکرو چاپیریال ښه پوهه.(د بیلګې په توګه د سیل سیل تعامل، د ګاز خپریدل، د میټرکس سره تعامل) اوس اجازه ورکوي چې ځینې حجرې لاینونه په سیروم فری میډیا کې کلتور شي.

1. د کلتور چاپیریال د حجرو په وده اغیزه کوي
مهرباني وکړئ په یاد ولرئ چې د هر حجرې ډول لپاره د حجرو کلتور شرایط توپیر لري.
د یو ځانګړي حجرې ډول لپاره د اړتیا وړ کلتور شرایطو څخه د انحراف پایلې د غیر معمولي فینوټایپونو څرګندیدو څخه د حجرو کلتور بشپړ ناکامي پورې.له همدې امله ، موږ وړاندیز کوو چې تاسو د سیل لاین سره آشنا شئ چې تاسو یې علاقه لرئ او په کلکه د هر محصول لپاره چمتو شوي لارښوونې تعقیب کړئ چې تاسو یې په تجربه کې کاروئ.

2. ستاسو د حجرو لپاره د غوره سیل کلتور چاپیریال رامینځته کولو لپاره احتیاطي تدابیر:
کلتور رسنۍ او سیرم (د نورو معلوماتو لپاره لاندې وګورئ)
د pH او CO2 کچه (د نورو معلوماتو لپاره لاندې وګورئ)
پلاستیک کښت کړئ (د نورو معلوماتو لپاره لاندې وګورئ)
د حرارت درجه (د نورو معلوماتو لپاره لاندې وګورئ)

2.1 کلتوري رسنۍ او سیروم
د کلتور منځنۍ برخه د کلتور چاپیریال ترټولو مهمه برخه ده، ځکه چې دا د حجرو د ودې لپاره اړین غذايي مواد، د ودې عوامل او هورمونونه چمتو کوي، او د کلتور pH او osmotic فشار تنظیموي.

که څه هم د حجرو کلتور لومړنۍ تجربې د نسجونو استخراج او د بدن د مایعاتو څخه ترلاسه شوي طبیعي میډیا په کارولو سره ترسره شوي، د معیاري کولو اړتیا، د رسنیو کیفیت، او د تقاضا زیاتوالی د ثابت رسنیو پراختیا لامل شوی.د میډیا درې بنسټیز ډولونه بیسال میډیا دي، د سیروم میډیا کمه شوې او سیروم فری میډیا، او دوی د سیرم بشپړولو لپاره مختلف اړتیاوې لري.

2.1.1 اساسی منځنی
د ګیبکو سیل کلتور منځنی
ډیری حجرې په لومړنیو رسنیو کې ښه وده کوي چې امینو اسیدونه، ویټامینونه، غیر عضوي مالګې، او د کاربن سرچینې (لکه ګلوکوز) لري، مګر دا بنسټیز میډیا فورمولونه باید د سیرم سره ضمیمه شي.

2.1.2 کم شوی سیرم منځنی
د ګیبکو ټیټ سیرم میډیم سره بوتل
د سیل کلتور تجربو کې د سیرم منفي اغیزو کمولو لپاره بله تګلاره د سیرم کم شوي میډیا کارول دي.کم شوی سیرم میډیم یو بنسټیز منځنی فارمول دی چې په غذايي موادو او د څارویو څخه ترلاسه شوي فکتورونو کې بډای دی، کوم چې کولی شي د اړتیا وړ سیرم مقدار کم کړي.

2.1.3 له سیروم څخه پاک منځنی
د Gibco سیروم څخه پاک میډیم سره بوتل
د سیرم څخه پاک میډیم (SFM) د مناسب تغذیې او هورمون فارمولونو سره د سیرم ځای په ځای کولو سره د څارویو سیرم کارولو مخه نیسي.ډیری لومړني کلتورونه او حجرې لاینونه د سیروم څخه پاک متوسطه فارمولونه لري ، پشمول د چینایي هیمسټر تخمدان (CHO) د بیا ترکیب پروټین تولید لاین ، د مختلف هایبرډوما سیل لینونه ، د حشراتو لیکې Sf9 او Sf21 (Spodoptera frugiperda) ، او همدارنګه د ویروس تولید لپاره کوربه. (د مثال په توګه، 293، VERO، MDCK، MDBK)، او داسې نور. د سیرم څخه پاک میډیم کارولو یوه اصلي ګټه د دې وړتیا ده چې د ودې فکتورونو مناسب ترکیب غوره کولو سره د ځانګړو حجرو ډولونو لپاره منځنی انتخاب کړي.لاندې جدول د سیروم څخه پاک میډیا ګټې او زیانونه لیست کوي.

ګټه
روښانه کول زیات کړئ
ډیر ثابت فعالیت
اسانه پاکول او د لاندې جریان پروسس کول
د حجرو فعالیت په سمه توګه ارزول
د تولید زیاتوالی
د فزیولوژیکي تعاملاتو ښه کنټرول
د سیل میډیا کشف کول
نیمګړتیا
د حجرو ډول ځانګړي منځني فارمول اړتیاوې
لوړ ریجنټ پاکوالي ته اړتیا لري
په وده کې سستوالی

2.2.1 pH کچه
ډیری نورمال تی لرونکي حجرې لاینونه په pH 7.4 کې ښه وده کوي، او د بیلابیلو حجرو لینونو ترمنځ توپیرونه کوچني دي.په هرصورت، ځینې بدل شوي حجرې لاینونه په یو څه تیزابي چاپیریال کې ښه وده کوي (pH 7.0 - 7.4)، پداسې حال کې چې ځینې نورمال فایبروبلاسټ حجرې یو څه الکلین چاپیریال غوره کوي (pH 7.4 - 7.7).د حشراتو د حجرو کرښې لکه Sf9 او Sf21 په pH 6.2 کې ښه وده کوي.

2.2.2 CO2 کچه
د ودې منځنی د کلتور pH کنټرولوي او په کلتور کې حجرې بفر کوي ترڅو د pH بدلونونو سره مقاومت وکړي.معمولا، دا بفرینګ د عضوي (د مثال په توګه، HEPES) یا CO2-بای کاربونیټ پر بنسټ بفرونو سره ترلاسه کیږي.ځکه چې د منځني pH د منحل شوي کاربن ډای اکسایډ (CO2) او بای کاربونیټ (HCO3-) په نازک توازن پورې اړه لري، په اتموسفیر CO2 کې بدلون به د منځني pH بدل کړي.نو ځکه، کله چې د CO2-bicarbonate-based buffer سره منځني بفر کارول، نو دا اړینه ده چې د خارجي CO2 څخه کار واخلئ، په ځانګړې توګه کله چې په خلاص کلتور کې د حجرو کلتور کول یا په لوړ غلظت کې د بدل شوي حجرو کرښو کلتور کول.که څه هم ډیری څیړونکي معمولا په هوا کې 5-7٪ CO2 کاروي، د حجرو کلتور ډیری تجربې معمولا 4-10٪ CO2 کاروي.په هرصورت، هر منځنی د مناسب pH او osmotic فشار ترلاسه کولو لپاره د CO2 فشار او بای کاربونیټ غلظت وړاندیز شوی؛د نورو معلوماتو لپاره، مهرباني وکړئ د منځني جوړونکي لارښوونو ته مراجعه وکړئ.

2.3 د پلاستيک کښت کول
د سیل کلتور پلاستیک په مختلفو بڼو، اندازو او سطحونو کې شتون لري ترڅو د مختلفو سیل کلتور غوښتنلیکونو سره سم وي.لاندې د سیل کلتور پلاستيکي سطح لارښود او د سیل کلتور کانټینر لارښود وکاروئ ترڅو ستاسو د حجرې کلتور غوښتنلیک لپاره سم پلاستيک غوره کولو کې مرسته وکړي.
ټول Thermo Scientific Nunc سیل کلتور پلاستیک وګورئ (د اعلاناتو لینک)

2.4 دحرارت درجه
د حجرو د کلتور لپاره غوره تودوخه تر ډیره حده د کوربه د بدن د تودوخې پورې اړه لري چې حجرې یې جلا کیږي، او تر یوې اندازې پورې د تودوخې اناتومي بدلونونو پورې اړه لري (د مثال په توګه، د پوستکي تودوخه ممکن د کنکال د عضلاتو په پرتله ټیټه وي. ).د حجرو کلتور لپاره، ډیر تودوخه د ډیر تودوخې په پرتله خورا جدي ستونزه ده.له همدې امله، په انکیوبیټر کې تودوخه معمولا د مطلوب تودوخې څخه لږ څه ټاکل کیږي.

2.4.1 د مختلفو حجرو لینونو لپاره غوره تودوخه
د انسان او تی لرونکو حجرو ډیری لینونه د غوره ودې لپاره د 36°C څخه تر 37°C پورې ساتل کیږي.
د حشراتو حجرې د غوره ودې لپاره په 27 درجو سانتي ګراد کې کرل کیږي؛دوی په ټیټه تودوخه کې ډیر ورو وده کوي او د تودوخې درجه د 27 درجو او 30 درجو ترمنځ وي.د 30 درجو څخه پورته، د حشراتو د حجرو ژوند کمیږي، حتی که دا بیرته 27 درجې C ته راشي، حجرې به بیرته نه راځي.
د حیواني حجرو لینونه د اعظمي ودې ته د رسیدو لپاره 38.5 ° C ته اړتیا لري.که څه هم دا حجرې په 37 درجو کې ساتل کیدی شي، دوی به ورو ورو وده وکړي.
د حجرو کرښې د سړې وینې حیواناتو څخه اخیستل شوي (لکه امفیبیان، د سړو اوبو کب) کولی شي د تودوخې پراخه لړۍ له 15 درجو څخه تر 26 درجو پورې برداشت کړي.